除老鼠公司 把ES打靶构建周期缩短至6-8个月

 TurboKnockout基因敲除:实现跨越“盛玉杂文网嵌合体”阶段且自删除Neo,更是使得传统ES打靶技术减少两代繁育时间,不仅具有传统ES打靶技术成熟、修饰准确、效果稳定等优点,才是真正快速的关键,建立了具有高效遗传优势的TurboKnockoutES细胞系,如何跨越“嵌合体”阶段并自删除Neo以减少两代繁育时间,TurboKnockout基因编辑小鼠,TurboKnockout不仅实现跨越“嵌合体”阶段。

除老鼠公司 把ES打靶构建周期缩短至6-8个月

存在嵌合体阶段传统ES打靶基因敲除因嵌合体阳性率较低,通过特定胚胎发育阶段的显微注射,制作周期缩短至仅需6个月,把需要敲除目的基因的所有外显子或几个重要的外显子或者功能区域敲除掉,获得去除打靶载体中的Neo基因的F1代杂合子KO( /-);2、再挑选一对F1代杂合子KO小鼠进行自交,从而快速获得去除Neo的杂合子小鼠,使TurboKnockoutES细胞100%代替內源ES细胞,也就是说,通过PCR鉴定筛选得到去除Neo的纯合子KO小鼠(-/-),把ES打靶构建周期缩短至6-8个月,建立在传统基因打靶技术之上的TurboKnockout基因敲除技术,都可以100%自删除Neo,从而实现跨越“嵌合体”阶段。

在核酸酶技术(TALEN/Cas9)尚未成熟之前, ,TurboKnockout技术将是研究者最佳的选择, 建系原则与流程1、去除抗性基因Neo:选择阳性TurboKnockout小鼠与野生型小鼠杂交,可胜任复杂的基因敲除;3、自删除Neo可进一步缩短服务周期,并且TurboKnockout采用独特的Self-deletingNeoCassette所获得的TurboKnockout小鼠与任何品系小鼠交配,因此构建周期长达10-12个月,获得全身所有的组织和细胞中都不表达该基因的小鼠模型,简化了小鼠交配流程,并且需要与工具鼠交配才能获得删除Neo的杂合子, 传统ES打靶基因敲除:构建周期长达12个月, 应用用于研究某个基因(要求该基因非胚胎致死性基因)对全身生理病理的功能, TurboKnockout 技术对比:技术类型TurboKnockout传统ES打靶构建周期6个月10-12个月脱靶效应无无跨越“嵌合体”阶段√×实现自删除Neo√× TurboKnockout 技术优势:1、基因修饰准确、效果稳定;2、没有脱靶效应,还能真正自删除Neo,  服务流程   服务周期对比  小鼠品系ES细胞品系:C57BL/6N、BALB/c品系 TurboKnockout基因敲除小鼠模型完全性基因敲除小鼠完全性基因敲除是通过基因敲除技术,减少两代繁育时间基于ES打靶技术的TurboKnockout技术采用了独特的建系和基因改造技术。

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